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毛細(xì)管電色譜儀的優(yōu)點(diǎn)及核心部件

儀器網(wǎng)小編2021-03-26 16:02:43

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電色譜是化學(xué)學(xué)科的分析化學(xué)專(zhuān)業(yè)的色譜分析類(lèi)中的***種新興分析技術(shù)。全稱(chēng)為毛細(xì)管電色譜,簡(jiǎn)稱(chēng)CEC。

 

毛細(xì)管電色譜儀整合了液相色譜(HPLC)和毛細(xì)管電泳(CE)的優(yōu)點(diǎn),在毛細(xì)管柱中填充固定相顆粒、管壁鍵合或涂覆固定相、制成連續(xù)床固定相,以壓力和電滲流共同驅(qū)動(dòng)流動(dòng)相,利用樣品各組分在固定相和流動(dòng)相中分配系數(shù)差異和本身淌度差異進(jìn)行分離。在液相色譜和毛細(xì)管電泳雙重分離機(jī)理的作用下,毛細(xì)管電色譜對(duì)樣品細(xì)微之處的分辨能力得到極大提高,既能分離帶電組分,又能分析中性分子,對(duì)復(fù)雜的混合樣品顯示出強(qiáng)大的分離潛力,代表微分離分析的趨勢(shì)。

 

毛細(xì)管電色譜采用液相色譜固定相,通過(guò)高壓輸液泵產(chǎn)生的液壓和在毛細(xì)管柱兩端加上高壓直流電場(chǎng)所產(chǎn)生的電場(chǎng)力,即依靠液壓和電滲流共同驅(qū)動(dòng)流動(dòng)相,使樣品組分根據(jù)它們的色譜行為和電泳速度的不同而達(dá)到分離。

 

其中,毛細(xì)管電色譜儀的核心部件是電色譜柱,按固定相形式不同可分為填充毛細(xì)管柱、開(kāi)管毛細(xì)管柱和整體毛細(xì)管柱。

 

填充毛細(xì)管柱是將固定相填充到毛細(xì)管中,通過(guò)兩端燒結(jié)柱塞將固定相保持在毛細(xì)管中而成。其***大優(yōu)點(diǎn)是可利用眾多的HPLC固定相,根據(jù)化合物與固定相的作用不同實(shí)現(xiàn)分離,在CEC中應(yīng)用非常廣泛。填充毛細(xì)管柱具有柱效高、固定相資源豐富的特點(diǎn),但也存在柱塞制備和柱填充,步驟繁瑣,重現(xiàn)性差的缺點(diǎn)。

 

開(kāi)管毛細(xì)管柱是將固定相鍵合或涂敷在毛細(xì)管壁上,引入色譜分配機(jī)理。與填充毛細(xì)管柱相比,由于沒(méi)有渦流擴(kuò)散,分離效率更高,分離時(shí)間大大縮短;由于不用柱塞,制備簡(jiǎn)單,減小了氣泡產(chǎn)生的可能性。但開(kāi)管毛細(xì)管柱的柱容量小,對(duì)溶質(zhì)的保留有限。

 

整體毛細(xì)管柱是采用有機(jī)和無(wú)機(jī)方法在毛細(xì)管中進(jìn)行原位自由基聚合反應(yīng)或固化,形成連續(xù)床固定相。整體毛細(xì)管柱***般采用柱內(nèi)直接鍵合的方法形成整塊多孔的交聯(lián)聚合物,不用柱塞,簡(jiǎn)化了柱制備過(guò)程。通過(guò)改變單體可引入多種官能團(tuán),有更好的多孔性和滲透性,對(duì)流動(dòng)相阻力小,溶質(zhì)在固定相和流動(dòng)相之間快速分配,有利于實(shí)現(xiàn)高速分離。可對(duì)生物大分子進(jìn)行快速分離。按基質(zhì)不同可分為無(wú)機(jī)基質(zhì)整體毛細(xì)管柱、有機(jī)基質(zhì)整體毛細(xì)管柱、顆粒固定化整體毛細(xì)管柱和雜化材料整體毛細(xì)管柱。

 

與液相色譜相比,毛細(xì)管電色譜的分析時(shí)間更短、柱內(nèi)徑更細(xì)、分離速度更快,使溶劑消耗量更少,由此產(chǎn)生的廢液更少,大大降低了成本,保護(hù)環(huán)境。目前,毛細(xì)管電色譜為蛋白質(zhì)組學(xué)、生物醫(yī)藥學(xué)、中草藥分析、環(huán)境保護(hù)、食品安全和手性化合物分析等領(lǐng)域提供了創(chuàng)新的技術(shù)手段。填充毛細(xì)管電色譜更是在蛋白質(zhì)分析中有著很大的潛力。


(來(lái)源: 儀器網(wǎng)小編)


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