【液體吸光度測量】典型配置、硬件說明、軟件操作
從紫外到近紅外再到更長的波長,吸光度測量提供了有關物質在所有狀態下的化學成分的有價值的信息。
吸光度測量優勢: 無損測量-除非你的樣品是光敏的,否則測量可以在不改變樣品的情況下重復進行。 定量結果-用吸光度測定溶液濃度。 準確性和重復性-使用適當的工具和方法,吸光度可以被量化,具有很高的測量到測量的精度。 【HL -2000 光源介紹】 光源的基本操作步驟: 啟動光源,預熱 10 分鐘,以達到穩定狀態; 光纖與光源連接后,可通過轉動調節光闌旋鈕控制光強; 如果用戶在實驗操作中對光源的輸出光譜有特殊要求,可在插片凹槽處放置濾光片、衰減片等光學器件。 圖2 HL-2000-FHSA 光源實物圖 圖 3 ***次性比色皿 圖4 石英比色皿 圖 5 CUV-UV 比色皿支架 圖 6 CUV-UV-10 比色皿支架 此外,海洋光學還提供 CUV-VAR 型可變光程的比色皿架,可調節光程范圍為 1-10cm, 內置的準直鏡固定在支架上,支架可在基座上滑動,CUV-VAR 適用于需改變光程的液體的吸光度測量。 圖7 CUV-ALL-UV 4-WAY 比色皿支架 圖8 CUV-FL-DA 直連比色皿支架 圖9 CUV-VAR 可變光程比色皿架 圖10 CUV-QPOD 可控溫比色皿支架 圖11 CUV-ALL-UV 4-WAY 比色皿支架實物圖 圖12 連接附件 02 硬件說明 搭建液體吸光度測量系統,具體操作步驟如下: 1)使用***根光纖連接比色皿支架與光譜儀,另***根光纖連接比色皿支架與光源,注意兩端光纖呈 180°(如圖14 所示); 2) 通過USB 數據線連接光譜儀至PC 端; 3)用電源線連接光源和市電插座(注意選擇帶地線的***標電源線和市電插座); 4) 打開光源,預熱***段時間后,在空比色皿中裝入純水,測量參考光譜; 5)切斷光路(此處不建議直接關閉光源,可通過遮擋光源來切斷光路),測量背景光譜; 6)恢復光路,將樣品裝入空比色皿,進行樣品的吸光度測量。 圖13 裝有樣品的比色皿 圖 14 CUV-ALL-UV 4-WAY 比色皿支架 圖15 遮光罩 圖 16 液體吸光度測量系統實物圖 圖17 Flame 光譜儀接口說明 注意:吸光度測量時,遮光罩應始終放置在樣品上方,排除環境光的干擾。 03 軟件操作 本部分介紹吸光度測量的軟件操作流程,具體操作步驟如下: 1)從歡迎界面或者點擊圖標 2)出現“選擇濃度模型”窗口,點擊“僅吸光度”選項,其他兩項見文檔***后的補充介紹。 僅吸光度:測量液體或氣體樣品的吸光度。 朗伯比爾定律:適用于測量未知濃度的樣品,在吸光度測量的基礎上,輸入樣品的消光系數和光程,利用朗伯比爾定律 ???? = ????cl,得到樣品的濃度。 3)調整好硬件配置后,在軟件中設置數據采集參數,包括積分時間(integration time)、平均次數(average)和滑動平均(boxcar)。用戶可根據光源的強度,調節積分時間和平均次數等參數,勾選 “暗噪聲校準”和“非線性校準”功能。注意參考 譜測量和樣品測量時的參數設置應相同。設置完成,光譜將顯示在右側譜圖界 面,點擊“下***步”按鈕。 積分時間:積分時間是檢測器在將累積的電荷通過A/D轉換器加工之前,被允許收集光子的時間長度。***小積分時間是設備支持的***短積分時間,它取決于檢測器讀出所有像素信息的快慢,積分時間 與數據傳輸速度是不同的概念。 平均次數:光譜被顯示到軟件里之前會采集多次,然后取平均。 滑動平均:平滑是***種可以應用于光譜的空間平均。該過程通過平均相鄰像素點的值來消除噪聲,因此它會以犧牲光學分辨率為代價來提高信噪比??臻g平均在光譜相對平坦以及相近像元變化較小的情 況下使用是非常有效的,但由此產生是分辨率的損失會使得尖銳的光譜特征峰難以分辨。當應用空間 平均時,信噪比會以像元平均的平方根為基數進行提高。請注意,在海洋光學軟件中,平滑寬度的值 是指所有像元以中間為基準靠左或靠右的像元和的平均數。平滑值是4實際上是將9個像元***起平均(4個靠左像元+1個中心像元+4個靠右像元),信噪比將以3為倍數增加。同樣的,平滑值是2(5個 像元)將使信噪比以2.2為倍數增加,平滑值是0(1個像元),信噪比以1為倍數增加(因此光譜不改 變)。 暗噪聲校準:海洋光學的大部分光譜儀都有自帶的遮光像元。暗噪聲校準會用當前光譜讀數減去遮光 像元的讀書,以排除溫飄等系統性影響。 非線性校準:光譜儀出廠前已完成。如無特殊需求,請默認勾選。 觸發模式:請參考海洋網站的相關文檔。如無特殊需求,可保持默認設置不變。 4)出現“保存參考光譜”窗口,點擊圖標 5)出現“保存背景光譜”窗口,點擊圖標 6)在視圖窗口中,吸光度測量結果以兩張圖譜的形式顯示。如下圖所示,左側為吸光度圖譜,右側為光譜全譜,圖譜結果均實時更新。點擊 創建新的光譜應用,在光譜應用向導中點擊吸光度向導圖標
。
保存參考光譜,再點擊“下***步”。
按鈕,保存背景光譜。之后點擊“完成”按鈕完成設置。
“以表格形式查看 結果”,即可查看圖譜的數據表,表中的數據可復制后粘貼到Excel 或 txt。
: 單步采集光譜數據,單次采集后停止,點擊運行,可繼續采集。